天游web原生态手机端 JMS-S3000 新螺旋TOFTM
MS 提示 519 号
简介
N型糖链是指N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)与天冬酰胺侧链的酰胺基结合的糖链。作为蛋白质的翻译后修饰之一，它对其结构和功能起着重要作用。此外，它还参与信号转导和免疫反应等生物学功能，其结构变化与疾病的发生和进展密切相关。特别是，N-聚糖作为癌症和先天性糖基化疾病的生物标志物而引起人们的关注。因此，N-聚糖的准确结构分析不仅在基础研究中而且在临床实践中都具有重要意义。因此，在本应用笔记中，我们将报告天游web原生态手机端 JMS-S3000 的 SpiralTOF 模式进行精确质量测量，并天游web原生态手机端标记的 N-聚糖（图 1）作为测量样品，天游web原生态手机端 TOF-TOF 模式进行结构分析。
测量条件
2,5-二羟基苯甲酸(DHB，由Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd制造)10 mg/mL(50% ACN-01% TFA水溶液)作为基质。测量样品标记为N-聚糖3-G1GN2M3GN2-2-氨基苯甲醛(3-G1 2AB，东京化成工业公司制造)50pmol/μL水溶液。将 05 µL 测量样品溶液点样在目标板上，然后加入 05 µL 基质溶液并风干以形成共晶。确认3-G1 2AB的峰，并天游web原生态手机端SpiralTOF模式（正离子模式）进行精确质量测量。然后，以TOF-TOF模式（正离子模式）进行结构分析。请注意，标记的 N-聚糖 3-G1 2AB 由 GlcNAc、甘露糖 (Man) 和半乳糖 (Gal) 组成。
图。 1 标记的 N-聚糖 3-G1 2AB 的结构(a) 和聚糖的符号命名法(b)
测量结果
天游web原生态手机端 SpiralTOF 模式的测量结果
SpiralTOF模式下的测量结果如图2所示。标记的N-聚糖3-G1 2AB被观察为Na离子加合分子（图2-a）。观察到的峰的质量分辨率超过70,000。接下来，天游web原生态手机端血管紧张素 I (AngI) 和促肾上腺皮质激素片段 1-17 人、大鼠 (ACTH1-17) 作为内标样品进行精确质量测量（图 2-b）。观察到的标记 N-聚糖 3-G1 AB 的实际值为 16215982，与计算值 16215973 相比，质量误差为 +09 mDa。图3显示了标记的N-聚糖3-G1 2AB的Na离子添加分子的同位素模式。观察到的同位素模式显示出与理论值相似的同位素模式。
图。 2 标记的 N-聚糖 3-G1 AB(a) 和标记的 N-聚糖 3-G1 2AB 与肽混合物的质谱图 (b)。
图。 3 理论同位素模式(a)与实测同位素模式(b)的比较。
TOF-TOF 模式下的测量结果
通过TOF-TOF模式获得m/z16216 的产物离子谱如图 4 所示。m/z23的峰，因此可以看出获得的标记N-聚糖3-G1 2AB的峰确实是Na离子加合分子。而且，它是在糖链的还原端侧保留有电荷的子离子m/zX 离子，如 392、595、1122 (▼) 和m/zY离子，如364、567、1093 (▼)。 X 离子是通过糖环内裂解产生的，从而产生保留糖环结构中包含的 O 原子的特征产物离子。另一方面，Y 离子是随着糖苷键的断裂而产生的，并且已知可以反映糖链的骨架结构。根据实际获得的Y离子，GlcNAc(■) , 男人(●) 和 Gal(●)的产物离子。从这些结果可以清楚地鉴定出标记的N-聚糖3-G1 2AB的组成糖。
图。 4 标记 N-聚糖 3-G1 2AB 的产物离子谱和建议的分配
摘要
通过 MALDI-TOFMS 测量标记的 N-聚糖。在 SpiralTOF 模式下，以高质量精度观察目标峰。此外，在TOF-TOF模式下，可以观察到源自糖环结构的X和Y离子，从而可以识别构成糖。上述结果表明，天游web原生态手机端 JMS-S3000 可以进行糖链的组成和结构分析。
