天游线路检测中心“SpiralTOF”介绍~牛血清白蛋白分析~
天游线路检测中心 提示 166
简介
天游线路检测中心“SpiralTOF™”是配备了我们独特的SpiralTOF型离子光学系统的MALDI-TOFMS。利用我们独特而卓越的技术，我们在有限的空间内实现了 17 m 的螺旋离子轨迹。螺旋轨迹是通过四组分层环形电场实现的，这些电场将九个马自达板合并在一个圆柱形电场中。在离子源中加速的离子依次穿过四组分层环形电场的每一层并到达检测器。如此长的飞行距离使得在宽质量范围内同时实现极高的分辨率和质量精度成为可能。
但是，SpiralTOF 光学系统与传统反射飞行时间质谱类似，无法检测飞行过程中自发裂解的极短寿命离子（例如质子化分子，如高分子量蛋白质和多磷酸化肽）。考虑到 MALDI 方法的广泛应用，需要一种可靠地检测此类短寿命离子的方法。因此，天游线路检测中心 具有“线性 TOF”选项。
这次，我们将介绍牛血清白蛋白 (BSA) 胰蛋白酶消化物的分析作为使用螺旋模式的分析示例，以及 BSA（完整）的分析作为使用线性模式的分析示例。
测量和结果
BSA 胰蛋白酶消化物以螺旋模式测量。使用 msTornado（一种 天游线路检测中心™ 的控制和测量程序）进行测量。™使用Control的自动测量功能，并使用外标法进行质量校准。使用MASCOT PMF方法检索所得结果，确认BSA为首次命中并鉴定。显示了搜索中使用的 BSA 胰蛋白酶消化物（相当于消化前 25 fmol 的蛋白质）的质谱（图 1）。匹配肽的质量误差为 3 ppm (RMS)（图 2）。
图。图3显示了使用线性模式测量BSA的结果。正如 BSA 一级结构所预期的那样m/z的一价离子和二价离子的信号。可以得到。
图。 1 tBSA 的质谱 (25 fmol)
图。 2 MASCOT 搜索结果的 RMS 误差
图。 3 BSA 的质谱 (25 pmol)
摘要
螺旋模式提供具有高质量精度的数据。当通过测量肽混合物使用 PMF 方法鉴定蛋白质时，即使肽容差设置为窄至 ±10 ppm，也可以鉴定蛋白质。这意味着可以获得高度可靠且误报较少的识别结果。
此外，通过使用线性模式，可以轻松确定大分子量蛋白质的分子量。
