Delta Ver 的制作11 —相关化合物混合物的定量分析— |应用说明|日本日本株式会社

NM190002

工艺 (C完成R减少到A振幅F频率Table) [1] 是一种新的高分辨率 NMR 数据分析概念，可基于贝叶斯分析 [2] [3] 将测量的 NMR 时域数据 (FID) 直接转换为包含每个分量的频率和振幅的电子表格。在通常的高分辨率NMR数据分析中，通过窗函数处理、相位校正、基线校正、傅里叶变换等将FID转换为频谱，并通过积分将频谱转换为定量信息。 CRAFT 可以用来替代这些传统方法。
如果样品溶液中含有与要定量分析的化合物类似的化合物，则使用常规积分进行定量分析会变得困难。这是因为类似的化合物由于其相似的化学结构，给出的信号接近分析物，并且在某些情况下，信号重叠。如果信号重叠，则积分获得的频率范围内的面积值反映了两种重叠化合物的丰度，因此它不是每种化合物单独的定量信息。另一方面，CRAFT 是以指数衰减波的叠加为模型的，因此，如果您要定量分析的化合物的振幅选择得当，则可以从每个重叠信号中获得定量信息。在本笔记中，我们将介绍使用 CRAFT for Delta Ver 进行定量分析的示例。 11 以药物成分混合物为例。

API 混合物¹核磁共振氢谱

阿西美辛和吲哚美辛的混合物用作相关化合物的示例（图 1)。阿西美辛是一种非甾体类抗炎药，是吲哚美辛的前药（阿西美辛被认为摄入后会在体内代谢，并表现出与吲哚美辛相同的药效）。此外，根据其化学结构，阿西美辛是吲哚美辛的羧甲基酯。因此，当阿西美辛溶液中存在吲哚美辛时，吲哚美辛信号与阿西美辛信号重叠 (图 1)。

图 1。在阿西美辛-吲哚美辛模型混合物中¹1H-NMR 谱。使用 JNM-ECZ400S 和 ROYAL Probe™ 获得光谱。

工艺的应用

对每个信号进行指纹识别并进行 CRAFT 分析 (图 2(a))。生成的电子表格作为指纹获得（图 2(b))。还证实重叠信号被分离成每个分量信号（图 2(c)）。加入内标物，利用内标物的振幅和阿西美辛的振幅，由式（1）计算含量（纯度）^*可以。

P_{A} = \frac{A_{A}}{A_{s T d}} \cdot \frac{N_{s T d}}{N_{A}} \cdot \frac{m_{s T d}}{m_{A}} \cdot \frac{m_{A}}{m_{s T d}} \cdot P_{s T d}

　・・・(1)

这里P、A、N、m、和m分别是纯度、振幅（或积分）、质子数、基重和分子量。此外，下标 A 和 std 分别指分析物和标准物质。

* 从 CRAFT 获得的幅度精度取决于信号的形状和信号重叠。对于定量值的准确性很重要的分析（例如，出于质量保证目的的分析），我们建议使用积分值计算纯度。

图2。阿西美辛-吲哚美辛模型混合物的 CRAFT 分析示例。
(a) 指纹设置。 (b) CRAFT 分析的结果。 (c) 检查每个部件。绿色：阿西美辛成分，棕色：吲哚美辛成分，蓝色：各成分的添加。

为了证明 CRAFT 在重叠信号定量分析中的实用性，我们制备了四种不同含量比例的阿西美辛和吲哚美辛的混合物 (表 1)，约 1 mg 4,4-二甲基-4-硅戊烷-1-磺酸-d6(DSS-d6)d6溶液已准备好。使用 JNM-ECZ400S 和 ROYAL Probe™ 进行测量。 NMR 测量基于日本工业标准K0138 [4]测量（观察范围：20 ppm，数字分辨率：025 Hz，无样品旋转，¹³带C去耦，脉冲重复时间：64秒）。使用与吲哚美辛重叠和不重叠的信号计算阿西美辛含量 (图 3(a))。
分别使用正常积分值和 CRAFT 幅度计算的定量值图 3(b)和(c)积分法中由非重叠信号计算出的含量值与由制备的权重计算出的含量几乎相同。另一方面，根据重叠信号计算出的含量值与根据制备时的重量计算出的含量不同。另一方面，当使用从CRAFT获得的振幅时，无论是否存在重叠，含量值都是准确的。
CRAFT 已显示出作为量化重叠信号的强大解决方案的潜力。

图3。实验证明 CRAFT 在重叠信号定量分析中的有用性。
(a) 4 阿西美辛和吲哚美辛混合物¹1H NMR 谱。 (b) 使用积分法的定量值和 (c) CRAFT。

参考文献

克里希那穆西； K,磁力。共振。化学。 (2013)51, 821–829.
布雷托斯特； GL，J。马格。共振. (1990)88，533–551。，布雷托斯特； GL，J。马格。共振. (1990)88，552–570。，布雷托斯特； GL，J。马格。共振. (1990)88，571–595。，布雷托斯特； GL，J。马格。共振. (1991)93，369–394。，布雷托斯特； GL，J。马格。共振. (1992)98, 501–523.
我们的应用笔记“CRAFT for Delta 版本 11 — 背景和用户界面介绍 —” ( NM190001).
JIS K0138:2018，定量核磁共振波谱的一般规则（qNMR 一般规则）。