天游线路检测中心 qNMR使用示例3~苦荞中槲皮素的测定~
NM100008
NMR 可让您从光谱中读取组成分子的原子数。因此，可以根据标准物质和目标物质的信号的积分强度比来进行定量。定量核磁共振（qNMR）无需待测物质的标准样品即可进行定量分析，因此待测物质的范围及其应用范围比其他定量分析更广泛。本应用说明介绍了直接从苦荞提取物中对槲皮素（苦荞中的一种功能成分）进行 qNMR 分析的示例。
测量目标：槲皮素
苦荞麦面以大量的功能性物质芦丁为主要成分，作为保健食品而受到关注。然而，由于市售苦荞面条中存在芦丁降解酶，因此几乎检测不到芦丁，而检测到槲皮素为主要成分。芦丁和槲皮素是典型的黄酮类化合物
槲皮素
图1 苦荞JNM-ECA600的qNMR谱研究方法：使用HPLC和qNMR定量分析苦荞提取物中的槲皮素。
图2市售试剂芦丁、市售试剂槲皮素和苦荞的qNMR谱
| 参数名称 | |
| 观察核心 | 1H |
| 观察范围 | -5ppm～15ppm |
| 数据点数量 | 32K |
| 数字滤波器 | 开(8x) |
| 重复时间 | 60 秒 |
| 翻转角度 | 90° |
| 累计计数 | 8 次 |
| 测量温度 | 25℃ |
| 旋转 | 关闭 |
对比NMR图谱，槲皮素和芦丁的6、8、5'、6'位信号几乎完全重叠，而苦荞的NMR图谱证实，6、8、5'、6'位有来自其他黄酮苷等的信号，同时还存在微量的芦丁，因此2'位置用于分析。
摘要
- 我们能够使用 qNMR 测量苦荞中槲皮素的纯度。
- qNMR得到的值作为标准品的纯度，LC定量分析结果与qNMR直接得到的分析结果几乎一致。
qNMR在无法获得具有准确纯度值的定量标准品时是一种有效的分析方法，但其灵敏度低于色谱法。然而，已经证实，通过组合使用qNMR评估所使用的标准品和进行色谱分析等方法，可以弥补各自的弱点，从而实现更可靠的定量分析。
图3 苦荞中槲皮素定量分析结果比较* 在LC分析中用作标准品的槲皮素试剂通过qNMR测定的纯度进行校正。参考文献
NSugimoto、ATada、T Suematsu 等人，JpnJFood ChemSafety，17(3),179-184
