天游线路检测中心 使用 SEM 观察食品中的细菌

化学固定

为了使用 SEM 同时观察含水食品和其中所含的细菌和霉菌等生物体，必须对样品进行适当处理。通常，样品是使用化学固定方法制备的。通过用化学物质对食物和生物中所含的蛋白质、脂质等进行化学固定，我们可以保持结构尽可能接近其原始状态。提取和洗涤样品后，我们主要用醛固定蛋白质，用四氧化锇主要固定脂质。之后，用酒精对样品中的水进行脱水，更换为适合干燥设备的溶剂，然后使用冷冻干燥器或临界点干燥器对样品进行干燥。另外，根据需要，对样品表面进行金属等涂层等导电处理，并进行SEM观察。

图1 一般生物样品（含水样品）制备方法

观察示例

图2显示了分离和培养的乳酸菌。用台式 SEM 观察。通过适当地进行化学固定、脱水、干燥和导电处理，即使使用台式SEM也可以清楚地观察到细菌。

图3是不加糖的酸奶。用戊二醛简单固定后，用叔丁醇代替样品，冷冻并在低真空 SEM 中冷冻干燥。冷冻干燥后，进行包衣并在高真空下进行SEM观察。观察到酸奶中存在两种类型的细菌：球菌（箭头：细菌①）和杆状细胞（箭头：细菌②）。

图2乳酸菌

加速电压：15kV 摄影放大倍数：x20,000 二次电子图像

• 戊二醛/四氧化锇双重固定
• 酒精（脱水）
• 乙酸异戊酯临界点干燥
• 镀金后高真空模式观察

图3酸奶

加速电压：15kV 摄影放大倍数：x5,000 二次电子图像

• 戊二醛固定
• 叔丁醇取代
• 低真空 SEM 冻干
• 镀金后高真空模式观察

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