天游线路检测中心 液相色谱质谱仪
什么是液相色谱质谱仪
液相色谱质谱仪（LC/MS），顾名思义，是一种连接液相色谱仪（LC）和质谱仪（MS）的设备，应用领域非常广泛。
气相色谱质谱仪（GC/MS）是挥发性物质的分析仪器，但LC/MS开始用作可应用于从挥发性物质到非挥发性物质等广泛领域的分析仪器。
近年来，色谱分析有从气相色谱 (GC) 转向液相色谱 (LC) 的趋势。其原因在于，GC可用于挥发性物质，但GC不能用于非挥发性物质，除非进行衍生化等化学处理使其具有挥发性。另一方面，对于 LC，这些衍生化是不必要的，并且目标样品区域比 GC 宽得多。然而，对于 LC，检测器存在一些缺点，必须根据样品及其特性进行选择。然而，使用 MS 作为检测器提供了更大的多功能性，并且有望提高识别精度，并且由于连接 LC 和 MS 的有效接口的出现和性能的提高，对 LC/MS 的需求正在迅速扩大。
LC/MS 接口
自 20 世纪 70 年代以来，人们对 LC/MS 接口进行了积极的研究，并提出并使用了各种方法。这些方法已发展为带式方法（将来自 LC 的流动相溶液滴到带上、加热并使用电子电离 (EI) 法进行测量）、喷雾法（其中将来自 LC 的流动相溶液雾化成气体并通过 EI 法电离）和热喷雾法。大气压电离方法出现于 20 世纪 80 年代末，如今该方法被广泛用作 LC/MS 接口的标准。 LC 在大气压下使用液体作为流动相，但 MS 需要高真空。大气压电离 (API) 方法是成功结合这些矛盾特性的接口。该方法中有两种类型的电离方法，一种是电喷雾电离（ESI），另一种是大气压化学电离（APCI）。
1)ESI法
这是一种将流动相溶液引入毛细管并通过在毛细管和对电极之间施加高电压来进行电离的方法。
该方法的特点是电离能是现有电离方法中最低的。这是唯一不仅可以获得生物聚合物样品而且还可以获得复杂异配位化合物的分子量信息的电离方法。
此外，当这种方法应用于蛋白质、肽和核酸时，它们可以被观察为多价离子。
例如，如果将分子量为10,000的化合物作为10价正离子观察，则所得质谱的m/z值（质荷比）将为1,001。获得这些多电荷离子的光谱作为具有特征分布的光谱，并通过计算机计算出准确的分子量。
抗体IgG2b的ESI多价离子谱和分子量计算结果（分子量约150,000）
2)APCI法
由于该方法被称为大气压化学电离，因此它使用流动相溶剂，其作用与化学电离中的试剂气体相同，并测量质子化分子离子和流动相溶剂离子。这是一种通过将喷雾液滴引入电晕放电区域来进行电离的方法。目标样品是极性低于 ESI 的化合物。
此外，由于化学电离需要高流动相溶剂浓度，因此使用每分钟1ml或更多的流速。
使用 APCI 方法的分析示例如下所示。目标样品是我们每天使用的绿茶。绿茶含有许多儿茶素，众所周知，儿茶素具有抗菌特性和多种益处。下面是将我们平时喝的茶20μl注入LC进行测定的结果。
从测定结果可以很容易判断绿茶中含有大量的氨基酸、儿茶素、咖啡因、芦丁等。
绿茶的 APCI-LC/MS 测量示例(EC:表儿茶素、EGC:表没食子儿茶素、ECg:表儿茶素没食子酸酯、EGCg:表没食子儿茶素没食子酸酯)
通过这种方式，LC/MS 可以轻松、灵敏地分析从生物聚合物到茶成分的各种样品。