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功能
这是一种使用光学显微镜 (LM) 和 TEM 观察放置在同一样品台(SiN 窗口芯片)上的样本超薄切片的方法。由于LM观察和TEM观察之间不存在涉及样品变形的过程,例如TEM样品制备,因此可以实现高精度叠加。
ty8天游官网登录 CLEM 使用专为 TEM 宽视场观察而开发的 SiN 窗口芯片。使用 SiN 窗口芯片,您可以通过将特殊固定器安装到光学显微镜观察支架上,轻松对超薄切片样品进行 LM 观察。 LM观察后,如果将特殊固定器转移到TEM支架上,则可以与TEM无缝地进行CLEM观察。
ty8天游官网登录 CLEM 工作流程(材料)具有自发荧光等材料的芯ty8天游官网登录 CLEM
1。树脂包埋
将样品嵌入环氧树脂等中
2。超薄切片
使用超薄切片机制作超薄切片在 SiN 窗口芯ty8天游官网登录安装部分
3。 LM观测
光学显微镜观察支架上装有特殊固定器,用于观察荧光、SPR(表面等离子共振)引起的散射光等
4。 TEM观察
更换 TEM 支架上的特殊固定器并获取 TEM 图像
ty8天游官网登录 CLEM 工作流程(生物标本)用于生物样品的芯ty8天游官网登录 CLEM(通过金颗粒的 SPR 使用散射光)
1。正面固定
用多聚甲醛固定
2。免疫染色(金标)
一抗与目标蛋白反应,然后结合纳米金标记的二抗
3。金敏化
敏化,使标记的金颗粒尺寸为20 nm或更大
4。后路固定/树脂包埋
TEM(戊二醛、四氧化锇)固定后,包埋在树脂中可实现超薄切片
5。超薄切片
使用超薄切片机制作超薄切片
6。染色
用乙酸双氧铀和柠檬酸铅染色
7。 LM观测
将特殊固定器安装到光学显微镜观察支架上,并使用暗视野观察来观察金SPR(表面等离子体共振)产生的散射光
8。 TEM观察
更换 TEM 支架上的特殊固定器并获取 TEM 图像
