天游ty8检测中心领域的 CLEM - 抛光 CLEM / 铣削 CLEM -
功能
示例HeLa 细胞(用位于细胞核和细胞膜的 ORP3 和位于回收内体的 Rab11 染色)成像设备共焦:A1,60x SEM:JSM-7900F
这是一种将细胞培养在带有转移标记等的培养皿上,用光学显微镜(LM)观察后,基于培养皿标记通过抛光等使表面露出相同视野并用SEM观察的方法。由于无需制作超薄切片,因此通过 LM 观察的细胞内部结构可以通过 SEM 轻松观察。此外,miXcroscopy™ 有助于同场观察识别。
抛光 CLEM/铣削 CLEM 工作流程
1。细胞培养
在可以识别其位置的培养皿上培养细胞,例如带有标记的培养皿或带有网格的盖玻片
2。 LM 观察(活细胞)
获取LM图像用标记记录菜品的位置信息
3。前缀/染色
细胞化学固定、免疫染色等
4。 LM 观察(固定细胞)
获取染色样本的LM图像用标记记录菜品的位置信息
5。后固定/树脂包埋
将细胞嵌入树脂中当树脂与细胞一起剥离时,标记被转移
*坐标导入
使用 miXcroscopy™ 时,此时将样品固定到特殊支架上,并将位置信息输入 SEM
6。机械抛光/离子铣削
通过抛光、离子铣削等方式暴露细胞观察面
7。涂层
涂覆样品表面
8。 SEM观察
获取 SEM 图像miXcroscopy™ 可让您轻松识别与 LM 图像相同的视野
