天游线路检测中心 生命科学领域的 CLEM
什么是 CLEM
CLEM（相关光电子显微镜）是一种光学显微镜 (LM)。
点击此处查看生命科学 CLEM 的每种方法。
抛光 CLEM / 铣削 CLEM
这是一种通过抛光或离子铣削暴露表面并使用SEM观察与LM图像（光学图像）相同视场的方法。
抛光 CLEM/铣削 CLEM 工作流程
在带有标记、预固定和染色的培养皿中培养细胞。 LM观察后，将固定后的树脂包埋样品安装到支架上并检查坐标。
此方法适用的应用示例
- 细胞内结构观察
- 大视野观察
- 多点观察
片上 CLEM
用于光学显微镜 (LM) 和透射电子显微镜 (TEM) 的相同样品台（SiN 窗口芯片）
片上 CLEM 工作流程
片上 CLEM 将为 TEM 准备的超薄切片安装到 SiN 窗口芯片上。氮化硅窗口
此方法适用的应用示例
- 超薄切片制备后可观察到荧光和特殊散射光的样品
- 能够进行相差观察等的样品
- 除生物样品外，还可应用于自发荧光墨粉颗粒和结晶聚合物
LLP-CLEM
超广域蒙太奇系统无限全景 (LLP)
LLP-CLEM 工作流程
在带有标记、预固定和染色的培养皿中培养细胞。拍摄LM图像后，对样品进行后固定并嵌入树脂中，并根据标记切割出目标区域。
此方法适用的应用示例
- 大视野观察
- 寻找少量突变细胞等
树脂 CLEM
在树脂中 CLEM 涉及对样品进行荧光染色并将其嵌入树脂中，然后制备超薄切片，恢复荧光，并对相同的切片进行光学显微镜和电子显微镜 (TEM/SEM)。
树脂 CLEM 工作流程
将超薄切片放在 SiN 窗口芯片（用于 TEM）或光滑的 Si 晶片或载玻片（用于 SEM）上。荧光再生剂
此方法适用的应用示例
- 可以引入荧光蛋白和荧光染料的培养细胞和组织，其荧光可以通过荧光再生剂恢复
- 需要高精度定位的样品，例如细胞器内蛋白质的定位
多色 CLEM
有机二氧化硅纳米粒子可以通过多种方式进行修饰，例如掺入荧光染料或添加重金属。含有荧光染料和重金属的有机二氧化硅纳米粒子被纳入细胞中。
多色 CLEM 工作流程
“绿色荧光+金颗粒”和“红色荧光+
此方法适用的应用示例
- 吞噬二氧化硅纳米粒子的巨噬细胞
- 吸收二氧化硅纳米粒子的微生物，例如草履虫和阿米巴虫
- 也可以通过静脉注射标记活体细胞
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